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淺述mRNA微流控制備儀的具體操作流程

更新時間:2025-01-16  |  點擊率:41
  mRNA微流控制備儀儀器操作流程介紹:
  1.準備工作
  設備與材料準備:確保微流控制備儀及其配套設備(如注射泵、壓力控制器等)正常工作,準備好所需的試劑和樣品,包括脂質溶液、mRNA 溶液、緩沖液等。
  芯片安裝:根據實驗要求選擇合適的微流控芯片,并正確安裝在制備儀上。注意芯片的方向和位置,確保其與儀器連接緊密且無泄漏。
  2.系統(tǒng)設置
  參數設定:在儀器的操作界面上設定所需的參數,如流速、壓力、混合時間等。這些參數應根據具體的實驗需求和樣品特性進行調整,以確保最佳的制備效果。
  清洗與校準:使用適當的溶劑對微流控系統(tǒng)進行清洗,去除殘留的雜質和氣泡。然后進行校準操作,確保儀器的準確性和穩(wěn)定性。
  3.樣品制備
  試劑配制:按照實驗配方準確配制脂質溶液和 mRNA 溶液。脂質溶液通常由多種脂質成分溶解在有機溶劑中制成,而 mRNA 溶液則需要將純化的 mRNA 溶解在緩沖液中。
  過濾處理:將配制好的脂質溶液和 mRNA 溶液通過 0.22 微米或更小孔徑的濾膜進行過濾,以去除可能存在的顆粒雜質,防止堵塞微流控芯片的通道。
  4.mRNA微流控混合
  進樣:將過濾后的脂質溶液和 mRNA 溶液分別吸入相應的注射器中,并將注射器安裝在注射泵上。然后,將注射器的出口與微流控芯片的入口連接,確保連接牢固且無泄漏。
  啟動混合:啟動注射泵,按照設定的流速將脂質溶液和 mRNA 溶液同時注入微流控芯片中。在芯片的微通道內,兩種溶液會在精確控制的流速下快速混合,形成脂質納米顆粒包裹的 mRNA。
  收集產物:從微流控芯片的出口收集制備得到的 mRNA-LNP 溶液,可根據需要進一步進行處理和分析,如粒徑檢測、包封率測定等。
  5.后處理與分析
  產物處理:對收集到的 mRNA-LNP 溶液進行必要的后處理,如透析、超濾等,以去除未反應的試劑和副產物,提高產物的純度和質量。
  質量檢測:使用動態(tài)光散射儀、透射電子顯微鏡等儀器設備對制備得到的 mRNA-LNP 進行粒徑分布、形態(tài)結構等質量檢測,確保其符合預期的要求。
  數據記錄與分析:記錄實驗過程中的各項參數和數據,如流速、壓力、溫度等,以及產物的質量檢測結果。對數據進行分析和總結,評估實驗效果,為后續(xù)的實驗優(yōu)化提供依據。